722型分光光度計(jì)的使用方法如下:
一、測(cè)量原理
分光光度法測(cè)量的理論依據(jù)是伯郎—比耳定律:當(dāng)容液中的物質(zhì)在光的照射和激發(fā)下,產(chǎn)生了對(duì)光吸收的效應(yīng)。但物質(zhì)對(duì)光的吸收是有選擇性的,各種不同的物質(zhì)都有其各自的吸收光譜。所以根據(jù)定律當(dāng)一束單色光通過(guò)一定濃度范圍的稀有色溶液時(shí),溶液對(duì)光的吸收程度A與溶液的濃度c(g/l)或液層厚度b(cm)成正比。其定律表達(dá)式A=abc
(a是比例系數(shù))。當(dāng)c的單位為mol/l時(shí),比例系數(shù)用ε表示,則A=εbc稱(chēng)為摩爾吸光系數(shù)。其單位為L•mol-1•cm-1它是有色物質(zhì)在一定波長(zhǎng)下的特征常數(shù)。
T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K•C•L(比色皿的厚度)
測(cè)定時(shí),入射光I, 吸光系數(shù)和溶液的光徑長(zhǎng)度不變時(shí),透過(guò)光是根據(jù)溶液的濃度而變化的,即“K”為常數(shù)。比色皿厚度一定,“L”、“I0”也一定。只要測(cè)出A即可算出“C”。
二、 722型分光光度計(jì)的使用
1、將靈敏度旋鈕調(diào)至“1”檔(信號(hào)放大倍率最�。�
2、開(kāi)啟電源,指示燈亮 ,選擇開(kāi)關(guān)置于“T”,波長(zhǎng)調(diào)至到測(cè)試用波長(zhǎng)。儀器預(yù)熱20分鐘。
3、打開(kāi)試樣室(光門(mén)自動(dòng)關(guān)閉),調(diào)節(jié)透光率零點(diǎn)旋鈕,使數(shù)字顯示為000.0。(調(diào)節(jié)100%T旋鈕),蓋上試樣室蓋,將比色皿
架處于蒸餾水校正位置,使光電管受光,調(diào)節(jié)透光率100%旋鈕使數(shù)字顯示100.0。如顯示不到100.0,則可適當(dāng)增加微電流放大的倍數(shù)。(增加靈敏度
的檔數(shù)同時(shí)應(yīng)重復(fù)(3)調(diào)節(jié)儀器透光率的“0”位)但盡量使倍率置于低檔使用。這樣儀器會(huì)有更高的穩(wěn)定性。
4、預(yù)熱后,按(3)連續(xù)幾次調(diào)整透光率的“0”位和“100%”的位置,待穩(wěn)定后儀器可進(jìn)行測(cè)定工作。
三、 吸光度“A”的測(cè)量
將選擇開(kāi)關(guān)置于A 。調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕,使得數(shù)字顯示為零,然后將被測(cè)樣品移入光路,顯示值即為被測(cè)樣品的吸光度值。
四、 濃度c的測(cè)量
將選擇開(kāi)關(guān)由“A”旋至“C”將已標(biāo)定濃度的樣品放入光路,調(diào)節(jié)濃度旋鈕,使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值,將被測(cè)樣品放入光路即可讀出被測(cè)樣品的濃度值。
五、注意事項(xiàng)
1、測(cè)量完畢,速將暗盒蓋打開(kāi),關(guān)閉電源開(kāi)關(guān),將靈敏度旋鈕調(diào)至最低檔,取出比色皿,將裝有硅膠的干燥劑袋放入暗盒內(nèi),關(guān)上蓋子,將比色皿中的溶液倒入燒杯中,用蒸餾水洗凈后放回比色皿盒內(nèi)。
2、每臺(tái)儀器所配套的比色皿不可與其它儀器上的表面皿單個(gè)調(diào)換。