一、外標法的概念
外標法又稱標準曲線法，依照測量標準品所繪制的曲線計量被測樣品含量的方法。
外標法是用待測組分的純品作對照物質(zhì)。此法可分為工作曲線法及外標一點法等。工作曲線法是用對照物質(zhì)配制一系列濃度的對照品溶液確定工作曲線，求出斜率與截距。準確進樣與對照品溶液相同體積的樣品溶液，根據(jù)待測組分的信號，從標準曲線上查出其濃度或用回歸方程計算，工作曲線法也可用外標二點法代替。
二、外標法的優(yōu)缺點
優(yōu)點：簡單、適合大量樣品分析；
缺點：
每次色譜條件很難相同，容易出現(xiàn)誤差；
我們作體外藥物分析時均采用外標法，體內(nèi)藥物分析，因提取步驟煩瑣，都采用內(nèi)標法進行校正，但如果儀器穩(wěn)定、方法的重現(xiàn)性好，也可使用外標法，國外體內(nèi)藥物分析用外標法的也有不少，但小析姐認為最好使用內(nèi)標法。
實際樣品檢測用外標法的更多，原因如下：
1.內(nèi)標物難獲得，特別是同位素標記的有相近行為的內(nèi)標物；
2.操作步驟多、計算煩瑣；
如，在新藥報批中使用內(nèi)標物，則需報送內(nèi)標物的結(jié)構確證資料，在報生產(chǎn)的同時還要報送此內(nèi)標物對照品。所以，現(xiàn)在連SDA的專家都不推薦使用內(nèi)標法。
最初使用內(nèi)標是因為進樣器進樣不準確，采用內(nèi)標可以校正進樣誤差�，F(xiàn)在的HPLC用定量環(huán)進樣準確度很高，加了內(nèi)標有時候因為操作的誤差反而降低準確度。在藥物質(zhì)量檢驗中，如果是原料藥，或者制劑的成份不多，用外標法即可，不一定非要用內(nèi)標法，并且目前越來越多的標準均放棄使用內(nèi)標法。
對于體內(nèi)藥物分析，分析方法的誤差反而不重要，而在樣品處理過程中引入的誤差要引起足夠的重視，所以，一般在處理過程中加入內(nèi)標以校正誤差。此時，回收率的高低要求并不高，雖然要求絕對回收率在70%或80%以上，但是，有時低一些也無所謂，關鍵是回收率的穩(wěn)定性、測定的重現(xiàn)性。
三、定量分析中怎樣選擇內(nèi)標法或外標法
內(nèi)標與外標都是氣相色譜儀定量的一種方法而已，至于方法的好壞不能一概而論，做不同的分析，面對不同的要求，再加上分析成本、分析效率等問題，簡單而有效進行定量分析滿足要求才最重要。
1、從前做過很多醫(yī)藥、農(nóng)藥中間體的芳香族鹵代化合物的常量定量分析，沒有自動進樣器，用外標法定量，確實重現(xiàn)性與穩(wěn)定性非常差，結(jié)果經(jīng)常受到搞合成同事的質(zhì)疑。
2、上面已經(jīng)提到當做方法驗證的時候，當同一樣品配制6個樣品溶液用所選用的外標法進行定量的時候，RSD都滿足1.5%的要求時，也分為兩種情況，小于1%和大于1%，小于1.5%。
3、對于微量分析，比如農(nóng)藥和獸藥殘留的分析、環(huán)境分析等，根據(jù)不同的限量標準要求對于精密度的要求也比常量分析的要求要寬松的多，RSD有時可以允許達到10%甚至更高，這時可能外標法有更大的應用空間。
4、單從精密度方面去考慮，排除其它成本和效率的因素，個人認為還是內(nèi)標優(yōu)于外標。
應用外標法能夠滿足要求，首選還是外標法了，畢竟簡單而省事。對于精密度要求比較高、結(jié)果準確度會產(chǎn)生重大影響、實驗室條件不是很理想的等等條件下，用內(nèi)標法還是必要的。無論應用那種方法，方法的驗證和確認都是很重要的，只要是按照程序經(jīng)過驗證和確認的方法，都有其應用的空間。
（文章參考實驗與分析網(wǎng)）
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