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一、熒光分光光度計的原理
熒光定量分析多采用工作曲線法,即以已知量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),按試樣相同方法處理后,配成一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,測定其相對熒光強度和空白溶液的相對熒光強度,扣除空白值后,以熒光強度為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),繪制工作曲線。然后將處理后的試樣配成一定濃度的溶液,在同一條件下測定其相對熒光強度,扣除空白值后,從工作曲線上求出熒光物質(zhì)的含量。
二、熒光分光光度計的組成
熒光分光光度計的基本結(jié)構(gòu)包括光源、發(fā)射單色器、樣品室、激發(fā)單色器及檢測器。
1、光源:F98熒光分光光度計光源為氙弧燈,能發(fā)射出強度較大的連續(xù)光譜,且在300nm~400nm范圍內(nèi)強度幾乎相等,故較常用。f96s熒光分光光度計采用led冷光源。
2、發(fā)射單色器:置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器,常采用光柵為單色器。作用是篩選出特定的發(fā)射光譜。
3、樣品室:通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時,光源與檢測器成直角安排,測量固體時,光源與檢測器成銳角安排。
4、激發(fā)單色器:置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或第單色器,篩選出特定的激發(fā)光譜。
5、檢測器:熒光分光光度計一般用光電管或光電倍增管作檢測器�?蓪⒐庑盘柗糯蟛⑥D(zhuǎn)為電信號。