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一、熒光分光光度計的選購
選購熒光分光光度計應(yīng)考慮以下三方面:
1、是否有正規(guī)廠家和檢測標(biāo)識
選購本儀器時應(yīng)注重對廠家資質(zhì)的篩查,務(wù)必權(quán)衡生產(chǎn)廠家的正規(guī)性,需悉心檢查提供的紙質(zhì)證明資料。拿到產(chǎn)品之后應(yīng)先查找外包裝的檢測標(biāo)識,但凡經(jīng)過檢驗的設(shè)備均會附有該標(biāo)識,如若沒有的話則直接詢問銷售人員,防止三無類型的產(chǎn)品。
2、是否有全面的服務(wù)
選購儀器時應(yīng)注重對服務(wù)的明確,完備的售后將會省卻很多繁瑣之事。在與銷售人員溝通的過程中,消費者應(yīng)詢問清楚關(guān)于服務(wù)的具體類目和期限,例如產(chǎn)品出現(xiàn)問題之后的解決途徑。
3、是否有實際演示的環(huán)節(jié)
選購本儀器時還應(yīng)注重面對面的實際操作,這一步驟關(guān)乎到后續(xù)使用的質(zhì)量,以及光度針性能的良好度。透過直觀的表象來品味設(shè)備性能的優(yōu)劣度,這部分內(nèi)容不可單從銷售人員一方的敘述得出,而應(yīng)加以綜合性的評判。
4、價格
消費者應(yīng)提前了解以下產(chǎn)品價格,甄別價格過高或過低的現(xiàn)象。同時考慮自己的預(yù)算來選擇合適的儀器。
- 熒光分光光度計的正確操作
1、軟件操作
熒光分光光度計定量分析時多采用工作曲線法,即以已知量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),按試樣相同方法處理后,配成一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,測定其相對熒光強(qiáng)度和空白溶液的相對熒光強(qiáng)度,扣除空白值后,以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),繪制工作曲線。然后將處理后的試樣配成一定濃度的溶液,在同一條件下測定其相對熒光強(qiáng)度,扣除空白值后,從工作曲線上求出熒光物質(zhì)的含量。
在熒光分光光度計用熒光分析法測定某些會引起熒光改變的微量物質(zhì)時,常采用差示熒光法,可使熒光強(qiáng)度的讀數(shù)差距拉大,使熒光強(qiáng)度的降低加大,從而提高方法的靈敏度和準(zhǔn)確度。
2、硬件操作
在使用時需要注意開機(jī)次序,熒光分光光度計開機(jī)順序一般為先開氙燈,然后開儀器主機(jī),接著開跟儀器連接的計算機(jī)。如此操作的原因在于穩(wěn)態(tài)氙燈是高壓點亮,為了避免瞬問脈沖電流對周圍設(shè)備造成影響,需要先開氙燈,等電流穩(wěn)定后再打開周邊的電腦等設(shè)備。關(guān)機(jī)順序則相反。
- 熒光分光光度計使用注意事項
1、樣品應(yīng)盛在四面透光的石英比色皿(熒光池)中,如果是揮發(fā)性樣品應(yīng)使用帶塞的熒光池。
2、在使用儀器進(jìn)行熒光分析時,為了得到穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù),一般需要開機(jī)預(yù)熱氙燈大約30分鐘。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈,預(yù)熱時間可以縮短到10分鐘左右。對某些易感光、易分解的熒光物質(zhì),盡量采用長波長、低人射光強(qiáng)度及短時間光照。
3、溫度變化可引起儀器熒光強(qiáng)度的改變。通常降低溫度,有利于提高熒光量子產(chǎn)率,熒光強(qiáng)度增大。溫度影響熒光強(qiáng)度的顯著程度因樣品而異,大部分熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度受溫度影響不大,測試溫度變化不超過±3℃,對測試結(jié)果幾乎無影響。
4、當(dāng)儀器的熒光物質(zhì)是弱酸或弱堿時,溶液的pH對熒光強(qiáng)度有較大影響。因為弱酸或弱堿在不同酸度中,分子和離子的電離平衡會發(fā)生改變,而熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度會因其離解狀態(tài)發(fā)生改變。
5、熒光分光光度計的熒光物質(zhì)分子與溶液中其它物質(zhì)分子之間作用導(dǎo)致熒光強(qiáng)度降低,常見的熒光猝滅劑,如鹵素離子、重金屬離子、02、硝基化物質(zhì)、重氮化合物等。溶液中的溶解氧也能引起幾乎所有的熒光物質(zhì)產(chǎn)生不同程度的熒光熄滅現(xiàn)象,因此在較嚴(yán)格的熒光實驗中必須除氧。