液相色譜使用時，經(jīng)流動相沖洗，柱與流動相達到平衡后，檢測器測出一段時間的流出曲線即基線，一般應平行于時間軸。基線信號的波動即噪音，通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩(wěn)定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致�；�隨時間的緩緩變化即漂移，主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩(wěn)定所引起，柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產(chǎn)生漂移。
液相色譜基線波動影響樣品測試，如何排查呢？
1、液相系統(tǒng)沒有平衡好，柱子里的流動相一直在變化，導致基線波動；
2、沒有脫氣機的儀器，當流動相未脫氣或脫氣未徹底時，基線會出現(xiàn)尖刺峰；
3、當色譜柱被污染時，也會造成基線波動；
4、檢測器的流通池被污染，造成吸收的不恒定，此時需要清洗流通池；
5、檢測器燈能量不足時，吸收會變得不穩(wěn)定，這時基線一般也不穩(wěn)定，特別是在低波長處尤為明顯；
6、當使用低波長檢測時，有時流動相會使用兩相或以上的等度，這時混合器的很小的混合比例的誤差都會被放大，很有可能會使基線發(fā)生波動；
7、流動相里的有機相的截止波長最好要小于檢測波長20nm以上；
8、實驗室環(huán)境不穩(wěn)定，比如溫度忽高忽低，氣流不斷變化等；
9、儀器出現(xiàn)問題也會造成基線波動，這種情況下通常也會出現(xiàn)壓力不穩(wěn)。比如流動相過濾頭堵塞、入口主動閥濾芯污染、單向閥被污染物堵塞、泵頭有氣泡、系統(tǒng)流路漏液，比如管路裂開、peek接頭沒完全連上色譜柱而導致的泄露等。
舉例：做多肽藥物時，流動相A：0.1%或者1%TFA水溶液，流動相B：0.1%或者1%TFA乙腈溶液，基線波動大，流動相中不加TFA時見不到主峰，基線良好。很明顯這是TFA加入流動相里，走梯度情況下造成的基線波動。TFA優(yōu)于其他離子修飾劑的原因是它容易揮發(fā)，可以方便地從制備樣品中除去。另一方面，TFA的紫外最大吸收峰低于200nm，因此在低波長下容易出現(xiàn)基線干擾。解決辦法可以建議在其中一瓶流動相中等比例加入另一瓶流動相的溶液。
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