一、液相色譜儀手動進(jìn)樣器
手動進(jìn)樣器的六通閥里有一個定子和一個轉(zhuǎn)子。定子上有六個孔,轉(zhuǎn)子上有三道或兩道槽,把它們兩個貼在一起,三道槽將六個孔兩兩聯(lián)通。
叫轉(zhuǎn)子自然是可以轉(zhuǎn)的,當(dāng)轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動60度,流路就會在Load和Inject這兩種狀態(tài)來回切換。在Load狀態(tài)下,從泵過來的流動相不經(jīng)過樣品環(huán),直接進(jìn)入到色譜柱。進(jìn)樣針可以插入進(jìn)樣閥,將樣品打入樣品環(huán)。當(dāng)轉(zhuǎn)到Inject狀態(tài)時,流動相經(jīng)過樣品環(huán),將樣品帶入到色譜柱。
二、自動進(jìn)樣器
沿著手動進(jìn)樣器的思路,如果我們要做一個自動進(jìn)樣器,應(yīng)該怎么做呢?第一,不能再讓人用手去掰進(jìn)樣閥了,需要用一個馬達(dá),按照程序要求來轉(zhuǎn)動進(jìn)樣閥,自動切換流路。第二,需要用一種自動的手段把小瓶里的樣品轉(zhuǎn)移到樣品環(huán)里面。
1、最早的進(jìn)樣器是通過在廢液口連接一個注射器來實現(xiàn)的。樣品盤把小瓶轉(zhuǎn)動到取樣針下面,由注射器往回抽取樣品到樣品環(huán)內(nèi)。接著馬達(dá)帶動六通閥轉(zhuǎn)動,樣品就被流動相帶到色譜柱了。它的缺陷如下:
首先,管路很長,浪費樣品。
其次,要將這么長的管路和取樣針清洗干凈,可不容易,需要比較復(fù)雜的洗針程序。
另外,只能進(jìn)行滿環(huán)進(jìn)樣,要更改進(jìn)樣體積,只能更換樣品環(huán)。
2、然后又有了第二種自動進(jìn)樣器,它將取樣針和注射器結(jié)合到一起,通過計量泵帶動針桿來取得精確量的樣品,取樣以后,針回到六通閥處,直接扎入到樣品孔,將樣品推入到樣品環(huán)。它的好處是:
管路緊湊,樣品不浪費,所以可以用于樣品量很少的進(jìn)樣。
另外,樣品可以全部轉(zhuǎn)移到樣品環(huán),相對來講,洗針的壓力較小。
可以滿環(huán)進(jìn)樣,也可以用計量泵來控制體積。
這兩種進(jìn)樣方式設(shè)計原理都很直接易懂,也是最被廣泛采用的進(jìn)樣方式。
3、第三種進(jìn)樣器是把樣品環(huán)和進(jìn)樣針都集成到整個六通閥的流路上,這樣進(jìn)樣以后,流動相持續(xù)的沖洗樣品環(huán)、進(jìn)樣針和針座,減小了交叉污染的可能性。當(dāng)整個流路處于主路的時候,流動相經(jīng)過計量泵、樣品環(huán)、針和針座然后回到六通閥,最后出去進(jìn)入色譜柱。這是在不進(jìn)樣時,處于的自然狀態(tài),絕大多數(shù)時候,它也是處于這個狀態(tài)。當(dāng)整個流路處于旁路的時候,泵過來的流動相直接就進(jìn)入了色譜柱,流路其他部分處于靜止?fàn)顟B(tài)。在這個狀態(tài)下,樣品針可以抬起來,等著機械手臂把樣品瓶放到針下面來,接下來由計量泵帶動活塞桿,進(jìn)行取樣工作。取樣后,六通閥再次切換到主路狀態(tài),樣品被流動相帶入到系統(tǒng),往色譜柱方向去了。
這樣很大程度上解決了樣品殘留問題,因為進(jìn)樣以后,自動進(jìn)樣器一直處于主路狀態(tài),也就是說計量泵、樣品環(huán)、進(jìn)樣針和針座都一直處于流動相的不斷沖洗之下,直到下一次再進(jìn)樣。但是,也會碰到一些新的問題:比如針和針座的連接,是通過密封圈來密封,長期處于高壓下,對密封性的要求很高,長時間使用會導(dǎo)致密封磨損,成本相對也會高一些。另外,進(jìn)樣量受到限制,一般來說樣品環(huán)都不超過100ul。
(內(nèi)容來源色譜學(xué)堂)
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